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                        如何選擇合適的核酸提取儀

                        更新時間??2022-03 閱讀 255

                        隨著生物技術的快速發展,伴隨著PCR技術在各個領域的應用,包括醫學疾病檢測、農業轉基因檢測等諸多應用,從樣品中高通量提取核酸變得極為迫切。很多公司都推出了全自動核酸提取儀,原理各種各樣,有的沒用,有的很貴。如何選擇合適的自動核酸提取儀,一定要仔細分析,才不會浪費錢。




                        核酸提取儀是一種通過使用匹配的核酸提取試劑從樣品中自動提取核酸的儀器。廣泛應用于疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業、分子生物學研究等諸多領域。


                        博科全自動核酸提取儀


                        核酸提取儀分類




                        1.根據不同的儀器型號和尺寸。


                        1)自動液體工作站


                        自動液體工作站是一個非常強大的設備,它可以自動完成液體的分離和吸取,甚至通過集成擴增和檢測功能,實現樣品提取、擴增和檢測的全自動化。提取核酸只是其功能的一個應用,不適合常規實驗室提取核酸。它一般適用于單一類型樣品和一次大量樣品(至少96個,通常為數百個)的實驗要求。自動化工作站平臺的建立和運行需要相對較大的資金。


                        2)小型自動核酸提取儀


                        小型自動化儀器利用其工作結構的特殊性,可以自動提取核酸,可以應用于任何實驗室。


                        2.根據不同的提取原理。


                        1)儀器采用離心柱法


                        離心柱法核酸提取儀主要采用離心機和自動移液裝置相結合的方法,通量一般為1-12個樣本,操作時間類似于人工提取,不能提高實際工作效率,而且價格昂貴,不同類型儀器的耗材不能通用,只適合資金充足的大型實驗室。


                        2)使用磁珠法的儀器


                        以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下分離核酸的原理,通過移動磁珠或轉移液體來實現核酸的整個提取純化過程。由于其獨特的原理,可以設計成多種通量,單管或8-96個樣品即可提取。其操作簡單快捷,提取96個樣品僅需30-45分鐘,大大提高了實驗效率,且成本低廉。因此可以在不同的實驗室使用,是目前市場上的主流儀器。


                        磁珠法自動核酸提取儀分為磁棒法和吸引法。


                        先說抽吸法:顧名思義,抽吸法是通過自動移液裝置進行的,加入裂解液和磁珠進行吸附;排出裂解液,加入沖洗液,用磁珠吸附,排出沖洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上看似乎沒什么問題,但是抽吸法*大的問題是,為了在去除廢液時不抽走磁珠,移液器不能離磁珠太近,防止磁珠和廢液被抽走,這樣每次抽廢液都有一小部分不能被完全抽走, 特別是底部有磁鐵的裝置,由于磁珠被磁鐵吸附在底部,移液器不能太靠近底部,這樣沖洗液就不能完全去除,沖洗液中殘留的鹽和乙醇也會對其產生影響。 磁體一側的裝置內殘留液體會少一些,但洗脫效率也不好。除非等待超過半小時,有些96自動核酸提取工作站提取一輪需要150分鐘,同樣時間的32磁棒法可以用5輪。


                        先說磁棒法核酸提取儀:磁通通常有8、16、32、96通道。磁棒法與抽吸法相比,優點是每一步的液體都不會殘留,因為磁棒只是帶走磁珠,轉移到下一步對應的反應孔中。另外,磁棒法選擇的萃取儀*好功能比較齊全,比如加熱,每個加熱罐獨立控溫比較好,可以設置加熱。還有一點很重要,驅動磁棒的電機要能帶動磁棒快速混合攪拌液體,有利于自動化和徹底的裂解和沖洗。磁棒法的通量選擇*好是32通道,96通道的通量看似更高,但有一個很現實的問題。96根磁棒從一個盤子轉移到另一個盤子時,磁棒上的液體中途掉落怎么辦?會掉在其他孔里造成污染,而32通道的磁棒軌跡不在其他樣品上方通過,這樣就不會有交叉污染。


                        磁珠法基本原理概述核酸提取儀




                        1.抽吸法又稱移液法,是通過固定磁珠和轉移液體來提取核酸,一般由操作系統控制機械手來實現轉移。提取過程如下:


                        1)裂解:向樣品中加入裂解液,通過機械運動和加熱使反應液混合并充分反應,細胞裂解,釋放核酸。


                        2)吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽、低PH值下對核酸親和力強的特點吸附核酸,在外加磁場的作用下,磁珠從溶液中分離出來,液體被吸料頭移出并丟棄到廢液罐中,廢棄。


                        3)洗滌:去除外加磁場,用新的吸頭加入洗滌緩沖液,充分混合,去除雜質,在外加磁場的作用下,去除液體。


                        4)洗脫:去除外加磁場,用新的吸頭加入洗脫緩沖液,充分混合,結合的核酸與磁珠分離,得到純化的核酸。


                        2.磁棒法


                        磁棒法是通過固定液體和轉移磁珠來分離核酸。原理和過程與吸法相同,不同的是磁珠和液體的分離方式。磁棒法是通過磁棒吸附將磁珠從廢液中分離出來,然后放入下一種液體中提取核酸。




                        磁珠法的特點核酸提取儀




                        1.可以實現自動化和高通量操作。


                        2.操作簡單快捷。


                        3.安全環保。


                        4.高純度和高收率。


                        5.無污染,結果穩定。


                        6.成本低,便于廣泛應用。


                        7.可以同時處理不同類型的樣品。


                        需要注意的事項


                        1.儀器安裝環境:正常大氣壓(海拔應小于3000米),溫度20-35℃,典型使用溫度25℃,相對濕度10%-80%,暢通無阻的流入空氣35℃以下。


                        2.避免將儀器放置在熱源附近,如電加熱器;同時,為了防止電子元件短路,應避免水或其他液體濺入其中。


                        3.進氣口和出氣口位于儀器背面,同時避免灰塵或纖維聚集在進氣口,保持風道暢通。


                        4.核酸提取儀離其他垂直面至少10cm,


                        5.儀器接地:為了避免觸電,儀器的輸入電源線必須接地。


                        6.遠離帶電電路:只有經過認證的專*維修人員才允許操作人員拆卸儀器、更換部件或在機器內進行調整,并且不要在接通電源的情況下更換部件。